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JapaneseÉdition et ingénierie du génome
Les avancées récentes dans les techniques d'édition du génome et de gène ciblé permettent aux scientifiques de choisir parmi de nombreuses approches moléculaires des modifications d'ADN ciblées très spécifiques de leur(s) gène(s) d'intérêt dans les lignées cellulaires et les modèles murins. Ces techniques, notamment l'exploitation des nucléases CRISPR/Cas9, des nucléases effectrices de type activateur de transcription (TALEN) et des nucléases à doigt de zinc (ZFN), ont permis aux scientifiques d'entreprendre des expériences d'édition du génome avec une facilité et une spécificité inégalées, ouvrant une nouvelle ère aux techniques et applications d'ingénierie du génome.
Production de lignées cellulaires et édition du génome
Les techniques d'édition du génome et de gène sont de plus en plus utilisées dans les études sur l'invalidation génique et la mutagénèse pour la production de lignées cellulaires et de modèles murins. Le système CRISPR/Cas9, en particulier, a été largement adopté pour entreprendre des expériences d'invalidation génique dans lesquelles l'effet d'invalidation peut être obtenu dans des lignées cellulaires stables, par rapport aux techniques classiques, transitoires et incomplètes, telles que l'interférence par ARN. La technologie CRISPR est fréquemment exploitée pour l'invalidation génique réversible, via l'interférence CRISPR (CRISPRi) et les méthodes de validation génique à gain de fonction sont également rendues possibles par le système CRISPR/Cas9. La précision et la relative simplicité du système d'édition de gène CRISPR ont permis aux scientifiques de modifier l'ADN de façon rapide et efficace dans les lignées cellulaires et les modèles murins produits, avec un large éventail d'applications possibles dans les domaines de la recherche et industriel. L'édition de gène a le potentiel de révolutionner les approches génétiques de la médecine personnalisée et pourrait inaugurer une nouvelle ère, permettant d'offrir des de traitement thérapeutique basées sur les gènes pour les maladies intraitables jusqu'ici
Flux de travail CRISPR et services GENEWIZ
GENEWIZ propose de nombreux services permettant de faciliter la recherche dans l'édition du génome. Le schéma ci-dessous illustre un flux de travail CRISPR type et les étapes où GENEWIZ peut vous aider à développer votre expérience.
L'édition du génome dans la recherche
Exemples actuels d'applications d'édition du génome et de gène :
Les chercheurs sur le cancer étudient l'implication d'un gène candidat dans la progression du cancer à l'aide du système d'édition de gène CRISPR pour éliminer la fonctionnalité du gène et analyser les effets en aval dans les lignées cellulaires stables modifiées.
Les chercheurs sur la malaria et les autres maladies transmises par les moustiques tirent parti du système d'édition du génome CRISPR pour perturber les gènes qui contrôlent la reproduction des moustiques femelles, permettant une approche génétique du contrôle de la population de moustiques pour les régions sensibles aux épidémies de maladies transmises par les moustiques.
Les chercheurs sur les cellules souches exploitent l'interférence CRISPR (CRISPRi) pour l'invalidation réversible de l'expression des gènes cibles dans les cellules souches pluripotentes induites (CSPi) afin d'étudier les effets sur les voies de développement suivantes.
Les scientifiques spécialisés dans les cultures de biocarburants utilisent des nucléases effectrices de type activateur de transcription (TALEN) pour perturber les gènes de lignine polyploïdes ou extrêmement redondants dans le génome du sucre de canne afin d'augmenter la disponibilité des sucres de la paroi cellulaire et d'améliorer la production d'éthanol dans la génération de biocarburants.
Applications de synthèse
Externalisez vos projets de synthèse de constructions (d'ARNg et donneuses) CRISPR auprès du leader du secteur en matière de synthèse de gènes de par sa qualité et son service client. De nombreuses options de synthèse différentes sont disponibles pour les constructions CRISPR :
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Service de synthèse de constructions d'ARNg CRISPR
Votre projet, notre garantie. Le service de synthèse de constructions d'ARNg de GENEWIZ fournit des constructions d'ARNg clonées dans votre vecteur de choix personnalisé avec des délais d'exécution rapides et un prix unique faible par construction. Vous fournissez la séquence et GENEWIZ s'occupe de la synthèse à façon, du clonage et de la vérification de séquences à un prix unique faible. Vous avez besoin de synthétiser un vecteur personnalisé ? Tirez parti de l'expertise, de la qualité et de la fiabilité de GENEWIZ pour les constructions difficiles dans vos projets de synthèse de vecteur personnalisé.
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Banques synthétiques
Vous cherchez à créer une banque d'ARNg pour cribler la validation/l'invalidation d'une variété de gènes dans une expérience ? Les services de banques synthétiques personnalisées de GENEWIZ peuvent créer une banque d'ARNg personnalisée pour les besoins de criblage CRISPR haut débit.
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CRISPR et les applications de validation de l'édition du génome
GENEWIZ propose une grande variété de méthodes de validation ciblée et non ciblée, tirant profit du séquençage de Sanger et du séquençage de nouvelle génération.
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Séquençage de nouvelle génération
A l'issue d'expériences d'édition du génome, les scientifiques doivent évaluer et confirmer les effets ciblés et non ciblés avant de procéder à toute application en aval. L'efficacité de l'édition du génome peut être déterminée pour les pools de transfectants ou évaluée après clonage. Que vous soyez intéressé par la confirmation des effets ciblés et non ciblés via le séquençage d'amplicons, les effets des transcriptomes via le séquençage de l'ARN, ou les effets au niveau du génome via le séquençage complet du génome, l'équipe de séquençage de nouvelle génération de GENEWIZ propose des solutions adaptées pour analyser la réussite de vos expériences CRISPR. Séquençage de l'ARN > Séquençage d'amplicons > Séquençage complet du génome >
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Séquençage Sanger
La confirmation des effets ciblés de l'édition du génome par le séquençage Sanger est facile et rapide. Les experts en séquençage Sanger vous fournissent des résultats rapides et fiables pour la validation de constructions CRISPR dans les expériences de toute taille. PROCHAINEMENT : GENEWIZ U6 Universal Primer ! En savoir plus >
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Package d'analyse CRISPR pour le séquençage et l'amplification par polymérase
Les experts en séquençage Sanger amplifient, purifient et séquencent vos régions d'intérêt ciblées et non ciblées spécifiées de votre expérience CRISPR. Le service d'analyse de mutations et de polymorphismes mononucléotidiques de GENEWIZ inclut la validation de l'amplification par PCR, la production et la purification d'amplicons, ainsi que le séquençage Sanger de vos régions d'intérêt CRISPR. Il vous suffit d'identifier votre région d'intérêt, puis GENEWIZ s'occupera de tout. L'extraction d'acide nucléique peut également être ajoutée à tout projet d'analyse de mutations et de polymorphismes mononucléotidiques. En savoir plus >
